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【配置方案】大小鼠脑出血造模方案

日期:2013-03-26 20:46:31点击:862
一、材料
  1. 动物:大鼠或者小鼠
  2. 试剂:胶原酶(厂家:ThermoFisher)、生理盐水
  3. 仪器设备和耗材,如下:
序号 货号 型号 名称 规格 单位 数量
1 10-0030 Nova1000 小动物麻醉机 移动型、异氟烷罐、POUR FILL、CAGE MOUNT。一体化集成功能配置:移动支架、内置气源泵、抽气泵、废气吸收罐、大小鼠预麻箱、抽屉箱、置物篮及管路 1
2 10-2203   小鼠定位仪专用面罩-G2   1
3 10-2204   大鼠定位仪专用面罩-G2   1
4 30-1040 SR200D 脑立体定位仪 大鼠、双臂、数显 1
5 20-0100 Elite100 脑立体专用微量注射泵 0.5ul-100ul,注射回抽,触屏 1
6 19-7010 FASTRONG 颅钻 0-35000RPM顺逆转,脚踏和手控,带钻头 1
7 16-0050 FOI304 LED冷光源 色温6000K,35W光强可调 1
8 16-0003 SM200B 体视显微镜 摇臂式双目 1
9 21-2000   HAMILTON注射器 5ul/700N/pst2尖头/26sG/51MM 1
10 18-8010   大脑手术器械包 13件套 1
11 18-8090   动物手术消毒套装 7件套 1
12 19-7001   小动物剃毛器   1
13 19-7223   红霉素眼膏 0.5%*2G(5支/包) 1
14 10-3022   气体吸收罐 #S,6个/箱 1
15 10-3026   活性炭 6袋/箱 1
16 24-0058   平衡木 1.25M 1
17 26-0080 HG620 爪抓力测试仪   1
18 26-0010 HR420M 转棒仪(6只小鼠)   1
19 26-0020 HR420R 转棒仪(4只大鼠)   1
 

二、方法(以大鼠为实验对象)
  1. 准备成年wistar大鼠,体重250-300g,禁食12h,禁水6h;
  2. 使用气体麻醉机,将动物放入预麻箱,异氟烷快速深度麻醉;
  3. 取出动物,将动物头部固定于立体定位仪上(安装有定位仪专用麻醉面罩),接通气体麻醉机,使动物维持麻醉,即可开始手术;
  4. 老鼠眼部涂红霉素眼膏,以防干裂;
  5. 老鼠头部备皮,酒精和碘伏棉球消毒后,头皮正中切口,剥离骨膜,确定前囟参考零点坐标,然后移动定位仪X和Y轴操作臂(右臂),定位到前囟后1mm,中线偏左3mm处,颅钻钻直径0.6mm的小孔;
  6. 进一步用固定在立体定位仪左臂的微量注射泵(装有注射器和药物)沿小孔中心位置,垂直缓慢进针,进针深度6mm(左侧尾状核的位置),设置注射参数,缓慢注入胶原酶VII0.5U(用生理盐水配成1U/uL),注药后留针10分钟;
  7. 注射完毕,缝合皮肤,回笼饲养,给予正常进食进水,室温控制在25度左右。
  8. 术后观察神经症状体征。

三、模型评判
  1. BBB观察评分:据Berderson等的评分标准分为三级。I级:将大鼠尾巴提起来,瘫痪侧前肢回收后屈曲于腹下,正常侧前肢向地面伸展;II级:除以上体征外,向瘫痪侧推大鼠时阻力较对侧明显降低;III级:除以上症状外,大鼠有向患侧侧旋的行为。出现以上症状为造模成功;
  2. 仪器测评:平衡木、爪抓力和转棒,与动物协调性、力量性指标相关仪器进行测量。


 

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